Tanaman Pasak Bumi (Eurycoma Longifolia Jack) merupakan salah satu tanaman herbal yang banyak terdapat di Asia tenggara, termasuk Indonesia. Akarpasak bumi memiliki banyak manfaat, salah satunya sebagai aktivitas antibakteri. Tujuan daripenelitian ini untuk mengetahui senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol akar pasak bumi serta mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar pasak bumi terhadap bakteri Propionibacterium acnes.Akar pasak bumi diekstraksi menggunakan etanol 96%dengan metode maserasi, kemudian dipekatkan menjadi ekstrak kental lalu dilakukan skrining fitokimia dengan menggunakan uji tabung dan diperkuat dengan Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Tahap selanjutnya dilakukan uji aktivitas antibakteri metode disk diffusion dengan kontrol positif klindamisin dan kontrol negatif DMSO 10% pada konsentrasi 12,5 μg/μL, 25 μg/μL, 50 μg/μL, 100 μg/μL, 200 μg/μL kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC parameter yang diamati berupa diameter hambat disekitar kertas cakram. Zona bening yang didapat diukur dan dianalisis data dengan Uji Kruskal-Wallis dengan taraf kepercayaan 95%.Hasil dari penelitian menunjukkan zona hambat pada konsentrasi 12,5 μg/μL, 25 μg/μL, 50 μg/μL, 100 μg/μL, 200 μg/μL, kontrol positif, kontrolnegatif terhadap bakteri Propionibacterium acnes adalah 0 mm; 0 mm; 2,67 mm; 3,33 mm;5,33 mm; 19,0 mm; 0 mm. Ekstrak mengandung senyawa metabolit alkaloid,flavonoid, saponin, tannin, dan steroid dengan Rf masing-masing 0,7; 0,8125;0,85; 0,8125; 0,5375.Analisis data yang ditunjukan tidak normal dan homogen